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目錄

1 前言 ........................................................................................................................... 1

2 儀器設備與試劑 ............................................................................................................... 2

3 實驗方法 ........................................................................................................................... 3

4 實驗結果 ........................................................................................................................... 4

5 結論 ................................................................................................................................... 7

6 參考文獻 ........................................................................................................................... 7

7 附錄 ................................................................................................................................... 8

1 前言

1.1 什么是著色劑

著色劑又稱食品色素，是以食品著色為主要目的，使食品賦予色澤和改善食品色澤的物質。

目前世界上常用的食品著色劑有 60 余種，我國允許使用的有 46 種，按其來源和性質分為食品合成著色劑和食品天然著色劑兩類：

• 天然著色劑：主要是指由動、植物組織中提取的色素，常用的有辣椒紅、甜菜紅、紅曲紅、胭脂蟲紅、高粱紅、葉綠素銅鈉、姜黃、梔子黃、胡蘿卜素、藻藍素、可可色素、焦糖色素等。
• 合成著色劑：主要以苯、甲苯等化工產品為原料，經過一系列反應制成。中國食品添加劑使用衛生標準列入的合成色素主要有胭脂紅、莧菜紅、日落黃、赤蘚紅、檸檬黃、新紅、靛藍、亮藍等。與天然色素相比，合成色素顏色更鮮艷、不易褪色、價格較低，但長期大量使用可能對身體造成傷害，因此需對其添加量進行檢測。

1.2 合成著色劑的性質

合成著色劑可分為偶氮類和非偶氮類兩種結構，在酸堿條件下均穩定；按溶解性可分為脂溶性和水溶性，其中脂溶性著色劑因不溶于水、體內不易排出、毒性較大，已不允許在食品行業添加，目前世界各國使用的合成著色劑多為水溶性偶氮類著色劑。

1.3 合成著色劑的毒性

合成著色劑少量食用可經肝腎代謝排出體外，但長期或一次性大量食用含量超標的食品，可能引發過敏、腹瀉等癥狀；攝入量過大時，會在體內蓄積，對腎臟、肝臟造成傷害。胭脂紅等染色劑還可能降低人體免疫力、增加癌癥發病率，因此飲品中著色劑的使用需控制在合理范圍，其含量檢測具有重要意義。

本實驗參考 GB/T 21916-2008《水果罐頭中合成著色劑的測定 高效液相色譜法》 及 GB/T 5009.35-2003《食品中合成著色劑的測定》，采用大連依利特公司生產的高效液相色譜儀，對著色劑標準品、線性及加標回收率等進行檢測方法驗證，并檢測實際飲品中檸檬黃、胭脂紅、日落黃的添加情況。

2 儀器設備與試劑

3 實驗方法

3.1 試劑及相關溶液配制

1. 0.02mol/L 乙酸銨溶液：稱取 1.54g 乙酸銨樣品于 1000mL 水中充分溶解，經 0.45μm 濾膜過濾后備用。
2. 混標儲備液：準確稱取檸檬黃、胭脂紅、日落黃標準品各 10mg，置于 50mL 容量瓶中，用水溶解并定容，得 200μg/mL 的混標溶液。
3. 標準混合工作液：移取不同體積的混標溶液，用流動相稀釋，得到濃度分別為 100μg/mL、50μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL 的標準系列。

3.2 樣品前處理

1. SPE 小柱的活化：使用前分別用 5mL 甲醇、5mL 去離子水活化。
2. 上樣和洗脫：準確稱取飲品 2g，加入 SPE 小柱，棄去流出液；用 2mL 水和 2mL 甲醇 - 甲酸 (7:3, V/V) 溶液淋洗；后用 5mL 5% 氨化甲醇洗脫，收集洗脫液。
3. 蒸干溶解：洗脫液在 65℃下氮氣吹干，用 2mL 流動相溶解，混勻后經 0.45μm 濾膜過濾后進樣。

3.3 色譜條件

流動相：A: 甲醇；B:0.02mol/L 乙酸銨溶液

色譜柱：SinoChrom ODS-BP 5μm 4.6×250mm

流速：1.0mL/min

檢測波長：254nm

進樣體積：10μL

柱溫：30℃

4 實驗結果

4.1 典型分析譜圖

4.2 線性相關性

分別移取不同體積的標準儲備液，配制濃度為 1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、50μg/mL、100μg/mL 的標準混合工作液，按濃度由低至高進樣分析，以濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制校準曲線，檸檬黃、胭脂紅、日落黃的線性相關性結果如下：

4.3 小檢出限

本系統的基線噪聲為25μV，根據3倍信噪比，儀器的小檢出限分別為檸檬黃20ng/mL，胭脂紅25ng/mL，日落黃18ng/mL。根據前處理方法計算，各目標物的方法檢出限分別為檸檬黃20μg/kg，胭脂紅25μg/kg，日落黃18μg/kg，參見表7。

4.4 實際樣品分析

按照上述方法分析中國檢驗檢疫科學研究院測試評價中心提供的飲品（樣品編號16-U343），測試含量結果見表8。

4.5 加標回收率

樣品中加入濃度為50μg/mL的混標溶液1mL，經過處理后分析，得到的各樣品的加標回收率見表9。

5 結論

采用大連依利特公司 iChrom 5100 高效液相色譜儀，參考 GB/T 21916-2008《水果罐頭中合成著色劑的測定 高效液相色譜法》及 GB/T 5009.35-2003《食品中合成著色劑的測定》并優化實驗條件后，對中國能力驗證中心提供的樣品進行檢測，結果如下：

• 檢出限：檸檬黃 20.0ng/kg、胭脂紅 25.0ng/kg、日落黃 18.0ng/kg；
• 線性關系：目標物濃度 - 峰面積曲線線性相關系數均為 1.0000，線性優良；
• 實際樣品含量：飲品中檸檬黃 20.7mg/kg、胭脂紅 0.230mg/kg、日落黃 41.1mg/kg，結果獲中國檢科院能力驗證中心認可。
• 綜上，該方法儀器靈敏度高、定性定量準確、精密度良好，能滿足飲品中著色劑含量測定需求。

6 參考文獻

[1] GB/T 5009.35-2003 食品中合成著色劑的測定

[2] GB/T 21916-2008 水果罐頭中合成著色劑的測定 高效液相色譜法

[3] GB 2760-2014 食品安全國家標準 食品添加劑使用標準

7 附錄

完整方案（PDF 版）下載提示

上述內容為《飲品中著色劑 HPLC 檢測解決方案》全文原樣呈現，完整 PDF 文檔額外包含以下核心資源，點擊鏈接即可獲取：

高清資料：圖 1（iChrom 5100 儀器實物圖）、圖 2（疊加譜圖）、圖 3（線性曲線）高清版（含峰形標注、數據細節）、實際飲品樣品檢測原始譜圖；

操作指南：SPE 小柱活化 / 洗脫操作視頻、氮吹儀使用教程、色譜柱維護細則；

拓展數據：不同品牌飲品（果汁、碳酸飲料、奶茶）著色劑檢測對比數據、方法精密度驗證報告（RSD＜2%）、長期穩定性測試結果；

附錄文件：GB/T 21916-2008、GB/T 5009.35-2003 標準原文節選、能力驗證計劃技術報告（ACAS-PT248）、耗材訂貨清單（色譜柱、SPE 柱、試劑型號編碼）。

下載通道

直接下載：m.wolaipei.cn/ 飲品著色劑 HPLC 檢測方案

技術咨詢：400-66-35483